ITSE培養(yǎng)基添加劑,100X血清替代重組蛋白

ITSE無血清培養(yǎng)基胰島素-轉鐵蛋白-硒-乙醇胺添加劑

英文名稱：ITSE (Insulin-Transferrin-Selenium-Ethanolamine)

中文名稱：胰島素-轉鐵蛋白-硒-乙醇胺添加劑

應用：細胞培養(yǎng)基添加劑，血清替代

基本特性：ITSE全稱是胰島素-轉鐵蛋白-硒-乙醇胺，是一種血清替代物（但不能*替代血清），使培養(yǎng)體系中血清的使用量低至4%（正常細胞培養(yǎng)需要10%）。

ITSE適合科研：干細胞培養(yǎng)，自配培養(yǎng)基，間充質干細胞、胚胎干細胞ES等。

ITSE適合工業(yè)：組織培養(yǎng)，可以在培養(yǎng)體系中降低血清濃度。

Insulin-Transferrin-Selenium-Ethanolamine (ITSE) is a basal media supplement and can be used to reduce the amount of fetal bovine serum (FBS) needed to culture cells. Insulin promotes the uptake of glucose and amino acids, transferrin is a non-toxic iron carrier, selenium is required for the function of glutathione peroxidase and other antioxidant enzymes, and ethanolamine is a phospholipid precursor. The components of the solution are manufactured animal-free and it is provided as a 100x sterile concentrate.

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ITSE培養(yǎng)基添加劑,100X血清替代重組蛋白:減少培養(yǎng)基血清使用

細胞和組織在體外能夠成功生長，有賴于培養(yǎng)方法的優(yōu)化，一般是試圖模擬體內的生理條件。該技術的一個關鍵因素是培養(yǎng)基的選擇。培養(yǎng)基中通常需添加動物血清。血清是由諸多成分組成的高度復雜的混合物，這些成分包括生長因子、激素、微量元素以及粘附和伸展因子等，它們發(fā)揮著多種生物學活性。

血清中白蛋白的含量高，這有助于細胞狀態(tài)的維持，作用機制包括防止pH值波動、抑制蛋白酶活性和保護細胞免受剪切力的傷害等[1,2]。盡管血清可以很好地維持細胞和組織的生長，但其作為培養(yǎng)基添加物具有明顯的缺點，如成本較高、貨源減少、實驗變異性大、可能影響下游操作和存在潛在的污染源和不利因素等。此外，人們對動物保護意識的提高也限制了血清的使用[2, 3]。

血清在細胞培養(yǎng)應用中的這些缺點使得近些年在科學研究和工業(yè)生產領域，人們對無血清培養(yǎng)基的需求日益增大[3]。

除了能夠克服血清的缺點，無血清培養(yǎng)基還具有兩個突出的優(yōu)點，即可針對特定的細胞類型配制的培養(yǎng)基，以及可精確地控制細胞的增殖和分化過程[2]。

基礎的無血清培養(yǎng)基雖然營養(yǎng)豐富、可足量提供細胞所必須的營養(yǎng)成分，但通常還需要進一步添加特定的組分，如生長因子、脂肪酸、維生素和微量元素等。多年的實踐表明，對于大多數(shù)細胞的無血清培養(yǎng)基，在基礎培養(yǎng)基(多為DMEM/F12)中必須額外添加ITS(胰島素-轉鐵蛋白-硒)[4]。而對于某些細胞，在培養(yǎng)基中還必須要添加乙醇胺[5]。

為什么選擇ITSE?

選擇ITSE添加物而非通常所用的ITS的優(yōu)勢在于：很多細胞培養(yǎng)需要乙醇胺才能達到*的生長狀態(tài)，使用ITSE添加物可保證所有類型的細胞均能得到充足的營養(yǎng)供應。

胰島素 (Insulin)

可促進細胞生長，調節(jié)細胞對葡萄糖、氨基酸和脂類的攝取和利用。胰島素也具有抵抗細胞凋亡的作用。在哺乳動物細胞的無血清培養(yǎng)時，重組胰島素的添加濃度遠高于其生理濃度，這樣胰島素除能與胰島素受體(Insulin Receptor, IR)結合，發(fā)揮代謝調節(jié)和抗凋亡作用外，還可通過激活胰島素樣生長因子(IGF-I)的受體，發(fā)揮促有絲分裂和抗凋亡作用，產生生長因子效應[6]。

硒 (Selenium)

是一種微量元素，它是谷胱甘肽過氧化物酶、硫氧還蛋白還原酶和其他抗氧化物酶的關鍵組分。硒已被確認是無血清培養(yǎng)基的必須添加物[8]。

轉鐵蛋白 (Transferrin)

是血清中富含的一種糖蛋白，能與三價鐵離子可逆性結合。其在鐵離子的轉運和代謝中發(fā)揮著至關重要的作用，同時也是一種重要的胞外抗氧化劑。因此，轉鐵蛋白是無血清培養(yǎng)基*的添加物。轉鐵蛋白zui初是從血清中分離出來的，然而由于批間差大和安全性差等問題，重組的轉鐵蛋白被越來越廣泛地應用。從各種表達系統(tǒng)，包括植物中獲得的重組轉鐵蛋白均具有相似的活性[7]。

乙醇胺 (Ethanolamine)

是一種有機化合物，它既是伯胺也是伯醇，可作為磷脂合成的前體。乙醇胺在雜交瘤細胞的增殖中發(fā)揮著重要的作用，因而經(jīng)常添加到雜交瘤細胞的無血培養(yǎng)基中。乙醇胺也用于其它類型細胞的無血清培養(yǎng)[5, 9]。

參考文獻：

1. Brunner, D., Frank, J., Appl, H., et al. (2010). Serum-free cell culture: the serum-free media interactive online  database. Altex, 27(1), 53.

2. Freshney, R. I. (2005). Serum‐Free Media. Chapter 10 in: Culture of animal cells, John Wiley & Sons. pp, 129-143.

3. Butler, M. (2013). Serum-free media: standardizing cell culture system. Pharmaceutical Bioprocessing, 1(4), 315-318.

4. Gstraunthaler, G. (2003). Alternatives to the use of fetal bovine serum: serum-free cell culture. Altex, 20(4), 275-281.

5. Murakami, H., Masui, H., Sato, G. H., et al. (1982). Growth of hybridoma cells in serum-free medium: ethanolamine is an essential component. Proceedings of the National Academy of Sciences, 79(4), 1158-1162.

6. Kim, J. J., & Accili, D. (2002). Signalling through IGF-I and insulin receptors: where is the specificity?. Growth Hormone & IGF Research, 12(2), 84-90.

7. Brandsma, M. E., Jevnikar, A. M., & Ma, S. (2011). Recombinant human transferrin: beyond iron binding and transport. Biotechnology advances, 29(2), 230-238.

8. Saito, Y., Yoshida, Y., Akazawa, T., Takahashi, K., & Niki, E. (2003). Cell death caused by selenium deficiency and protective effect of antioxidants. Journal of Biological Chemistry, 278(41), 39428-39434.

9. Tsao, M. C., Walthall, B. J., & Ham, R. G. (1982). Clonal growth of normal human epidermal keratinocytes in a defined medium. Journal of cellular physiology, 110(2), 219-229.

：含無動物源的胰島素、轉鐵蛋白

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